打靶基因	相关疾病	产品编号	产品名称
F8	A型血友病	C001211	F8 KO
F9	B型血友病	C001509	F9 KO
F11	C型血友病	C001272	hF11
Hbb	β地中海贫血(HBB)	C001508	Hbb-bs&Hbb-bt DKO
Flvcr1	先天性纯红细胞再生障碍性贫血	S-CKO-06994	C57BL/6J-Flvcr1em1Cflox/Cya
Flvcr1	先天性纯红细胞再生障碍性贫血	S-KO-06025	C57BL/6J-Flvcr1em1C/Cya
Usp1	范可尼贫血	S-CKO-07336	C57BL/6J-Usp1em1Cflox/Cya
Usp1	范可尼贫血	S-KO-06331	C57BL/6J-Usp1em1C/Cya

 

 

模型验证数据——以β地中海贫血Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠为例

Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠是同时敲除了小鼠Hbb-bs和Hbb-bt基因所构建的β地中海贫血疾病模型。该模型纯合致死，杂合小鼠呈现血红蛋白含量、红细胞计数、红细胞压积、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞分布宽度、血小板数、脾脏大小和红细胞形态等指标异常的严重地中海贫血典型特征并具有生育能力。因此该小鼠可用于与β地中海贫血相关的研究。

 

(1) 生长曲线

 

 

图1. 杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠和野生型（WT）小鼠的体重变化曲线。雌性和雄性杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠均呈现和野生型小鼠较为一致的生长状况。

 

(2) 生存曲线

 

 

图2. 杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠和野生型（WT）小鼠的生存曲线。雄性杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠在第13周开始出现死亡情况，雌性杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠在第15周开始出现死亡情况。

 

(3) 血常规检测

 

图3. 14周龄雄性杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠和野生型（WT）小鼠血常规检测。血常规检测结果表明，与野生型小鼠相比，杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠的红细胞计数（RBC）、血红蛋白含量（HGB）和红细胞压积（HCT）显著下降，平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）略有下降，而红细胞分布宽度（RDW）和血小板计数（PLT）明显上升。这些参数变化与相似基因突变类型导致的β地中海贫血临床表型相似。

 

(4) 血涂片分析

 

 

图4. 14周龄雄性杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠和C57BL/J野生型小鼠血涂片检测分析。血涂片分析结果显示杂合Hbb-bs&Hbb-bt DKO小鼠有核细胞数占比增加，红细胞中央浅染区扩大且出现较多异形、碎片红细胞和有核红细胞。其外周血中存在靶形红细胞（黄色箭头）、棘形状红细胞（红色箭头）、泪滴状红细胞（绿色箭头）和破碎状红细胞（蓝色箭头）等多种异常形态红细胞。C57BL/J野生型小鼠红细胞形态结构完整，呈现双凹圆盘状且未见明显异常。

 

参考文献

[1]https://edition.cnn.com/2023/11/16/health/uk-casgevy-approval-crispr-gene-editing-sickle-cell-scn/index.html

[2]Zhang F, Zhang B, Wang Y, Jiang R, Liu J, Wei Y, Gao X, Zhu Y, Wang X, Sun M, Kang J, Liu Y, You G, Wei D, Xin J, Bao J, Wang M, Gu Y, Wang Z, Ye J, Guo S, Huang H, Sun Q. An extra-erythrocyte role of haemoglobin body in chondrocyte hypoxia adaption. Nature. 2023 Oct;622(7984):834-841.

[3]Trimborn T, Gribnau J, Grosveld F, Fraser P. Mechanisms of developmental control of transcription in the murine alpha- and beta-globin loci. Genes Dev. 1999 Jan 1;13(1):112-24.