近期，英国凯特王妃被疑患有克罗恩病（CD）的消息引起了公众的广泛关注，也使得更多人开始关注这种被视为“绿色癌症”的疾病[1]。其实克罗恩病并非真正意义上的癌症，而是一种慢性炎症性肠病（IBD）。之所以被称为“绿色癌症”，是因为其临床表现多样、个体差异大、累及范围广、病情易复发且治疗困难。一旦确诊，患者将需要终生与疾病相伴。
炎症性肠病（IBD）现状
炎症性肠病（IBD）是一种特发性肠道炎症性疾病，主要累及回肠、直肠和结肠。其临床表现为腹泻、腹痛，甚至可能出现血便。IBD包括两种亚型：溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。IBD发病机制十分复杂，涉及遗传、免疫反应、环境因素以及肠道感染等多个方面。目前，全球超过1000万人患有IBD，而在我国，IBD发病率也已超过3/100,000[2]。然而，IBD的诊断过程复杂，且目前尚无治愈方法。随着疾病护理成本的不断增加，人们迫切需要采取有效策略来减轻这种疾病的负担。
图1 炎症性肠病（IBD）的分类[3]
IL10与IBD的关系
白介素10（IL10）是一种关键的IBD易感基因，其功能缺陷是溃疡性结肠炎（UC）发病的核心机制[4]。此外，其基因遗传多态性也可导致UC或克罗恩病（CD）发生[5]，在具有明显家族史性的极早发型炎症性肠病（VEO-IBD）患者中，IL10及其受体IL10R的单基因突变检出率很高[6]。因此，能模拟人类IBD临床表型的IL10基因敲除（IL10 KO）小鼠是研究中最常用的遗传模型[7]。IL10 KO小鼠在IL-23和Th1样炎症驱动以及在微生物刺激下，会出现自发性和持续性结肠炎，这种表型高度依赖于遗传背景。在SPF条件下，BALB/c背景品系IL10 KO小鼠发病时间早，疾病渗透性高，疾病表型严重且群体间发病差异性小，可以在合理时间范围内精准重现人类慢性结肠炎的各个方面[8-9]，因此在疾病机制研究和药物筛选方面具有显著优势。
图2 广泛使用的IBD小鼠模型[7]
赛业生物开发了多款用于炎症性疾病研究及治疗药物筛选和评估的小鼠模型。其中BALB/c-Il10 KO小鼠（产品编号：C001527）是一种BALB/c背景的Il10基因敲除模型，能自发炎症性肠病，表现为体重异常、生存率降低、炎症因子水平升高以及肠道炎症和肠道表型异常等表型，其具体数据如下。
生长曲线和生存曲线
BALB/c-Il10 KO小鼠体重相比野生型小鼠有所减轻。从第10周开始，小鼠开始出现死亡，且随着疾病的进展，其存活率进一步降低。
图3 BALB/c-Il10 KO小鼠的生长曲线和生存曲线
发病情况和疾病活动指数（DAI）
根据疾病活动指数（DAI）和克罗恩病活动指数（CDAI），对BALB/c-Il10 KO小鼠发病情况进行量化分析。结果表明，BALB/c-Il10 KO小鼠在8至9周龄开始出现病症。雄性小鼠发病周期早于雌性小鼠，16周龄左右时所有雄性小鼠都已发病。随着年龄增加，其疾病严重程度也在逐步加剧。
图4 BALB/c-Il10 KO小鼠发病情况和疾病评分
外观和体态
观察雄性BALB/c-Il10 KO小鼠外观和体态可以发现，在22周龄左右，其肠炎表型已经非常严重。小鼠出现腹泻、便血、直肠脱垂以及体态异常等症状。
图5 雄性BALB/c-Il10 KO小鼠在22周龄时的外观
结直肠解剖检查
对野生型小鼠和已发病BALB/c-Il10 KO小鼠进行解剖观察，发现BALB/c-Il10 KO小鼠结直肠肠壁增厚，肠体变粗，颜色变得红润，并出现炎症。同时，肠内容物黏稠并弥散，粪便形状不规则。数据还显示，雄性小鼠发病早于雌性小鼠，且病情更为严重。
图6 野生型小鼠和已发病BALB/c-Il10 KO小鼠结直肠解剖对比
肠道组织H&E染色
取野生型小鼠和BALB/c-Il10 KO小鼠的结直肠进行H&E染色检测。结果显示，在早期发病阶段（10W），BALB/c-Il10 KO小鼠结直肠组织出现炎症细胞聚集和隐窝破损等表型。随着疾病发展到晚期（22W），这些表型变得更加严重，甚至出现杯状细胞脱落等现象。
图7 野生型小鼠和BALB/c-Il10 KO小鼠肠道组织H&E染色结果对比
炎症因子表达水平
小鼠肠道组织炎症因子表达的RT-qPCR检测结果显示，与野生型和未发病BALB/c-Il10 KO小鼠相比，已发病BALB/c-Il10 KO小鼠肠道组织中TNF-α和IL6等炎症因子表达水平显著升高。
图8 已发病BALB/c-Il10 KO小鼠体内炎症因子水平显著升高
总 结
BALB/c-Il10 KO小鼠（产品编号：C001527）在8～9周龄开始出现病症，主要表现为体重下降、生存率降低、炎症因子水平升高以及肠道炎症和肠道表型异常。雄性小鼠病情发展更早且更严重，到22周龄时，出现腹泻、便血和直肠脱垂等严重症状。此外，小鼠结直肠肠壁增厚，肠体变粗，颜色红润，肠内容物黏稠弥散，粪便形状不规则等肠道炎症表型也较为明显。组织学检查发现，BALB/c-Il10 KO小鼠在发病早期的结直肠组织中，炎症细胞聚集和隐窝破损现象明显，至晚期还伴有杯状细胞脱落。已发病BALB/c-Il10 KO小鼠体内的TNF-α和IL6等炎症因子表达水平显著升高。因此，BALB/c-Il10 KO小鼠作为一种自发炎症性肠病模型，可用于克罗恩病 (CD) 和结肠炎的研究，同时也适用于癌症、先天性免疫和适应性免疫以及其他炎症或自身免疫研究领域。
此外，赛业生物还提供多种自发性或诱导性炎症疾病模型和靶点人源化模型，以满足研发人员在炎症或自身免疫等研究领域的实验需求。
参考文献：
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