大脑中的NPY/AgRP神经元仅存在于下丘脑弓状核（ARC），在饥饿状态下高度活跃。这些神经元不仅通过增加神经肽Y（NPY）信号传导，还通过释放AgRP来抑制黑皮质素信号传导，从而制造肽类物质，有效促进食欲^[1]。AGRP基因编码的刺鼠肽基因相关蛋白（Agouti-related protein, AgRP）是一种由NPY/AgRP神经元在大脑中产生的神经肽，主要在下丘脑弓状核、肾和肾上腺中表达。AgRP仅在下丘脑弓状核腹侧部分的含有神经肽Y（NPY）的细胞体中合成，并与NPY共表达，起到增加食欲、减少新陈代谢和减少能量消耗的作用，是最有效和持久的食欲刺激剂之一。

图1 NPY/AgRP神经元位于下丘脑弓状核内^[2]

赛业生物利用基因编辑技术构建了Agrp-IRES-CreERT2-P2A-tdTomato小鼠（产品编号：C001558），在小鼠内源性Agrp基因调控元件驱动下，该小鼠表达他莫昔芬诱导型CreERT2重组酶。此外，该品系的CreERT2重组酶表达元件后携带了一个红色荧光蛋白（tdTomato）表达元件，可用于Agrp阳性细胞的谱系追踪。在未经他莫昔芬处理时，CreERT2重组酶只存在于细胞质中。经他莫昔芬处理后，CreERT2重组酶才能进入细胞核并发挥其重组作用。当Agrp-IRES-CreERT2-P2A-tdTomato小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，经他莫昔芬诱导可以在子代小鼠的AgRP阳性神经元中引发由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

图2 下丘脑中Cre重组酶的表达情况

将Agrp-IRES-CreERT2-P2A-tdTomato小鼠与条件性表达Zsgreen荧光蛋白的LSL_Zsgreen小鼠交配，他莫昔芬（Tamoxifen）诱导完成后，采集子代小鼠的下丘脑组织并通过冰冻切片检测组织中Zsgreen蛋白的自发荧光情况。结果显示，在他莫昔芬处理后，Agrp-IRES-CreERT2-P2A-tdTomato; LSL_Zsgreen双阳性小鼠下丘脑中存在自发绿色荧光信号且信号特异性存在于下丘脑弓状核（ARC）区域。

图3 下丘脑中Zsgreen绿色荧光蛋白表达与tdTomato红色荧光蛋白表达的共定位情况

通过tdTomato蛋白表达的免疫荧光染色（IF）检测，确定该模型中tdTomato蛋白标记的细胞类型。结果显示，Agrp-IRES-CreERT2-P2A-tdTomato; LSL_Zsgreen双阳性小鼠在他莫昔芬处理后的下丘脑中可同时检测到tdTomato红色荧光蛋白和Zsgreen绿色荧光蛋白信号，且Cre重组酶诱导的Zsgreen绿色荧光信号与小鼠内源性Agrp调控的tdTomato荧光信号共定位，表明在该模型中Cre重组酶的表达模式与小鼠内源性Agrp相同。

在Agrp-IRES-CreERT2-P2A-tdTomato小鼠（产品编号：C001558）模型中，Cre重组酶的表达主要集中于下丘脑弓状核（ARC）区域。

赛业生物团队以丰富工具模型资源库为目标，不断致力于研发更高效的工具鼠模型。