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科研笔记(三)|基于Hep G2的细胞培养、基因编辑以及CDX模型构建
2024-11-22

Hep G2细胞是一种人肝癌细胞系,最初是从一位15岁白人男性肝癌患者的肿瘤组织中分离获得的。这种细胞系具有无限的生命周期、稳定的表型、高可用性和易于处理等特点,在细胞生物学、遗传毒理学、病毒学和肿瘤生物学研究中有着广泛的应用。

 

Hep G2细胞小卡片

细胞名称:Hep G2(人肝癌细胞)

生长特性:贴壁生长,上皮细胞样形态,常有空泡

培养条件:DMEM+10%FBS

培养环境:95%空气+5%二氧化碳;37℃

 

Hep G2应用方向

1. 肝癌研究

用于研究肝癌的发病机制、耐药机制和癌症治疗等领域。

 

2. 药物代谢和肝毒性研究

Hep G2细胞在形态和功能上与人类肝组织相似,可用于药物代谢和肝毒性测试,帮助评估新药的安全性和有效性。

 

3. 病毒学研究

用于研究乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)等肝炎病毒相关的病毒复制和致病机制。

 

4. 基因编辑和功能研究

Hep G2细胞可以通过基因编辑技术进行改造,以研究特定基因的功能和在疾病中的作用。

 

5. 细胞毒理学实验

用于评估化学物质和药物对肝脏的潜在毒性。

 

Hep G2细胞培养

高质量的胎牛血清有助于细胞贴壁和形成单层细胞。在培养过程中细胞内容易形成空泡,是该细胞的正常特性,不影响细胞生长。细胞培养注意事项如下:

 

  • 控制好传代比例,避免细胞过于拥挤或稀疏,否则会影响细胞的生长
  • 消化时注意吹散细胞团
  • 培养时需要每天观察培养基的颜色,及时换液,以免影响细胞贴壁

 

利用Smart-CRISPR™基因编辑Hep G2细胞系

 

基因修饰项目

Hep G2细胞系的基因修饰包括基因敲除、点突变、KI、过表达和干扰等,赛业生物通过优化Hep G2的单克隆制备方法,实现Hep G2基因编辑单克隆交付,可显著提高实验的准确性和可靠性,为肝脏相关疾病研究提供更坚实的基础。

 

基因编辑注意事项

  • 细胞转染前确保状态良好,细胞密度70%左右;
  • 消化时尽量吹散成单个细胞;
  • 挑克隆法制备单克隆,使用赛业定制条件培养基,将细胞接种至10cm培养皿中,待生长一段时间后挑取克隆至96孔板继续培养。

 

Hep G2细胞皮下移植肿瘤模型

赛业生物已验证的体内CDX验证肿瘤细胞系超200种,能为大家进行体内体外基因功能研究、药物靶点筛选及药效学研究等提供重要的细胞系资源。我们的细胞系模型验证数据稳定,并具备多项IND评价项目经验,所构建的抗肿瘤药效模型市场覆盖率90%以上,种类全、数量多、质量优。

 

基于Hep G2的细胞培养、基因编辑以及CDX模型构建

图1 肝癌细胞Hep G2皮下移植肿瘤及体重生长曲线(n=8)

 

将细胞以皮下注射的形式接种到7周的C-NKG和8周的NOD-Scid小鼠体内,并在不同的时间点测量成瘤体积。细胞接种量为9×106/只和1×107/只,数据以Mean±SEM形式呈现。结果显示Hep G2在C-NKG和NOD-Scid小鼠上容易建模。肿瘤体积预计在接种后22天达到100-200mm3,在接种后45天达到2000mm3实验终点,给药窗口期预计在23天左右。

人肝癌细胞
Hep G2应用方向
Hep G2细胞培养
Hep G2细胞

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