溶菌酶是一种重要的抗菌酶，广泛存在于动植物和微生物体内。它通过水解细菌细胞壁中的糖苷键而起到杀菌作用，是机体防御系统的重要组成部分。编码溶菌酶的基因和溶菌酶的表达模式在不同物种之间存在差异，人类含有一个溶菌酶基因（LYZ），而小鼠则有两个基因（Lyz1和Lyz2），小鼠Lyz1和Lyz2分别编码Paneth细胞和白细胞中的溶菌酶 ^[1]。

Lyz1基因编码溶菌酶C，在胚胎间质、肠道、肝脏和胆道系统以及肺中表达。Paneth细胞是溶菌酶C的主要来源，通常存在于小鼠的小肠中。Paneth细胞变异和溶菌酶的异常产生是炎症性肠病（IBD）病理的标志。研究表明，靶向破坏Paneth细胞溶菌酶（Lyz1）可保护小鼠免于实验性结肠炎。缺乏Lyz1基因削弱了肠道对细菌分子模式的免疫反应，导致对溶菌酶敏感的溶解黏液细菌扩展 ^[2]。

图1. Paneth细胞溶菌酶决定了溶解黏液微生物群的组成和肠道的炎症状态 ^[2]

1. Lyz1-H2BmCherry-lRES-CreERT2小鼠

赛业生物利用基因编辑技术研发构建了Lyz1-H2BmCherry-lRES-CreERT2小鼠（产品编号：C001567），将H2BmCherry-lRES-CreERT2组件敲入到小鼠Lyz1基因中以驱动其特异性表达，该构建策略破坏了小鼠内源Lyz1基因的表达。在未经他莫昔芬处理时，CreERT2重组酶只存在于细胞质中。经他莫昔芬处理后，CreERT2重组酶才能进入细胞核并发挥其重组作用。此外，该模型还携带了红色荧光蛋白（H2BmCherry）表达元件，可用于Lyz1阳性细胞的谱系追踪。当Lyz1-H2BmCherry-IRES-CreERT2小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交，子代小鼠经他莫昔芬诱导后将在小肠潘氏细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间序列重组。

2. 成年小鼠的小肠潘氏细胞中存在Cre重组活性

图2. 小鼠回肠中Cre重组酶的表达情况。

将Lyz1-H2BmCherry-IRES-CreERT2小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配。当子代小鼠发育到8周龄时进行他莫昔芬（Tamoxifen）诱导，Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）的删除将导致tdTomato荧光蛋白在Cre阳性细胞中表达。诱导完成后，采集小鼠的回肠组织并通过冰冻切片观察自发荧光的情况，以确定Cre重组酶的表达。根据组织学形态结构分析，结果显示在Cre+TAM+小鼠的小肠腺底部潘氏细胞中存在明显的橙色tdTomato自发荧光，提示在此类组织中已发生Cre重组。

3. 模型总结

在Lyz1-H2BmCherry-IRES-CreERT2小鼠（产品编号：C001567）模型中，Cre重组酶在成年小鼠小肠潘氏细胞中显著表达，该模型可用于靶向小肠潘氏细胞的组织特异性研究。赛业生物更多Cre工具鼠库热门推荐，请点击查看

参考文献

[1] Markart P, Faust N, Graf T, Na CL, Weaver TE, Akinbi HT. Comparison of the microbicidal and muramidase activities of mouse lysozyme M and P. Biochem J. 2004 Jun 1;380(Pt 2):385-92.

[2] Yu S, Balasubramanian I, Laubitz D, Tong K, Bandyopadhyay S, Lin X, Flores J, Singh R, Liu Y, Macazana C, Zhao Y, Béguet-Crespel F, Patil K, Midura-Kiela MT, Wang D, Yap GS, Ferraris RP, Wei Z, Bonder EM, Häggblom MM, Zhang L, Douard V, Verzi MP, Cadwell K, Kiela PR, Gao N. Paneth Cell-Derived Lysozyme Defines the Composition of Mucolytic Microbiota and the Inflammatory Tone of the Intestine. Immunity. 2020 Aug 18;53(2):398-416.e8.