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点突变细胞系

点突变细胞系

基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,我们可提供精准、高效的基因定点突变细胞定制服务。通过赛业生物优化的α-donor体系将人源化的Cas蛋白、gRNA和donor三组分转染至目的细胞,产生高效同源重组,实现单克隆纯合子交付,快至6周。

点突变细胞系定制服务

基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,我们可提供精准、高效的基因定点突变细胞定制服务。通过赛业生物优化的α-donor体系将人源化的Cas蛋白、gRNA和donor三组分转染至目的细胞,产生高效同源重组,实现单克隆纯合子交付,快至6周。

实验流程

基因/细胞<br>分析
基因/细胞
分析
sgRNA、donor<br>设计与合成
sgRNA、donor
设计与合成
细胞转染及<br>KI效果鉴定
细胞转染及
KI效果鉴定
单克隆化
单克隆化
测序分析
测序分析
复检及扩增
复检及扩增

交付内容

细胞鉴定报告;实验报告(含载体报告、实验流程、测序原始数据等);点突变单克隆纯合子细胞株

规模庞大、品种齐全的科研细胞库

神经系统
BV-2
SH-SY5Y
SK-N-SH
LN229
U251
U-87 MG
ARPE-19
BeWo
……
呼吸系统
BEAS-2B
Calu-1
NCI-H1975
SK-MES-1
NCI-H460
A549
NCI-H1299
NCI-H358
……
循环(心血管)系统
NK-92
U266B1
HL-60
K-562
RPMI 8226
CCRF-CEM
Reh
HuT78
……
消化系统
FaDu
Caco-2
T84
HCT 116
NCI-H716
RKO
HT-29
SW480
……
生殖系统
CHO-K1
C-33 A
Hela
LNCaP Clone FGC
PC-3
22RV1
SK-OV-3
NIH:OVCAR-3
……
泌尿系统
ACHN
HEK 293
293-L.P
786-0
HK-2
Caki-1
SW-13
5637
……
运动(肌肉)系统
HT-1080
MG-63
U-2 OS
RD
Saos-2
SW1353
A-673
C2C12
……
内分泌系统
SHZ-88
BHK-21
HPDE6-C7
ZR-75-1
MCF-7
MDA-MB-231
T-47D
SK-BR-3
……
免疫系统
U-937
RAJI
HMy2.CIR
A375
A-431
SK-MEL-28
SU-DHL-2
A875
……

点突变细胞系服务优势

点突变技术
全新升级
点突变技术全新升级
提供准确快速的点突变细胞株构建方案
02

自研的α-donor载体点突变系统

HDR效率高达87%(远超行业水平),可实现无痕修复(footprint-free)。
03

项目进展快人一步

24h内出具方案,定期反馈进展;项目交付快至6周
04

保证交付单克隆纯合子

有限稀释法、挑克隆等多种单克隆筛选方案和定制的培养基优化方案,纯合子率高达70%

成熟的技术平台

从体内动物实验到体外细胞实验,拥有18年基因编辑经验,每年构建体内体外模型超万例,已有多篇文献引用发表,可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析的全流程服务。

独创Smart-CRISPR™技术

拥有全新升级的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,轻松实现基因敲除、基因敲入等多种策略,编辑效率高达90%。

规模庞大、品种齐全的科研细胞库

我们建设了有各项参数明确、性能稳定的科研细胞库,极大程度规避了基因编辑对细胞的负面影响。

严格的质量控制体系

进行细菌、支原体等微生物的双重检测,确保100%无污染,并充分鉴定基因编辑效果;进行细胞活率检测,保证交付质量。

点突变细胞系服务案例

1. 自研的α-donor系统在不同细胞中的编辑效率

细胞类型Cell Pool HDR效率测序峰图单克隆纯合子阳性率
A549人非小细胞肺癌细胞87%
WT序列:CATCATGAAGAAGGGGTACAAGGTG
点突变序列:CATCATGAAGAAAGGGGCCAAGGTG
70%
HEK 293人胚胎肾细胞80%
WT序列:TGTGAAAATTTACCGAGCAGA
点突变序列:TGTGAAAATTTACTGAGCAGA
50%
HCT-15人结肠癌细胞系57%
WT序列:CCTGGACAGAGAACATCCAAG
点突变序列:CCTGGACAAAGAACATTCAAG
41%
iPSC人诱导多能干细胞62%
WT序列:TGACTGCTGACAAAG
点突变序列:TGACTGCTGATAAAG
50%

2. SCARB1(p.K500N, K508N)双位点突变

SCARB1是高密度脂蛋白(HDL)的主要受体,促进肝脏从HDL摄取胆固醇。通过CRISPR/Cas基因编辑技术,将肝癌细胞的SCARB1突变成SCARB1(p.K500N, K508N)。如图所示,在点突变附近设计sgRNA和包含点突变的Donor,利用α-donor体系将gRNA和Donor递送到Huh-7细胞中,Cell Pool检测到的HDR效率为40%,通过制备单克隆获得Huh-7/SCARB1(p.K500N, K508N)双位点突变纯合子克隆。

精选客户案例

1. The mechanism of STING autoinhibition and activation.

Molecular cell (2023)THP-1/STING点突变细胞

2. Hepatocytic lipocalin-2 controls HDL metabolism and atherosclerosis via Nedd4-1-SR-BI axis in mice.

Developmental cell (2023)携带Srb1(K500A K508A)突变的HepG2细胞