基因敲入小鼠

基因敲入小鼠是指通过基因工程的方法在目的基因位置引入特定的特变或外源基因的小鼠模型。

1. 去除抗性基因Neo：选择阳性TurboKnockout^® KI小鼠与野生型小鼠杂交，自删除Neo，获得去除打靶载体中的Neo基因的杂合子F1代小鼠。

2. 再挑选⼀对杂合子F1代小鼠进行自交，通过PCR鉴定筛选得到F2代纯合子KI小鼠。

条件性基因敲入小鼠是指将重组酶系统或者诱导系统导入基因位置，可以实现条件性敲入的目的从而控制基因的表达。

1. 将F0代阳性雄鼠（Founder）与野生型雌鼠（WT）进行交配，筛选获得Neo去除的F1代（CKI/+）小鼠。

2. 将一部分F1代（CKI/+）小鼠进行自交，获得F2代（CKI/CKI）小鼠；将另一部分F1代（CKI/+）小鼠与组织特异性（或诱导型）表达Cre工具鼠交配，获得F2代（CKI/+, Cre）小鼠。

3. 将F2代（CKI/CKI）小鼠与（CKI/+, Cre）小鼠交配，获得组织特异性（或诱导型）基因敲入小鼠（CKI/CKI, Cre）小鼠。

人源化小鼠是一种实验动物模型，通过基因编辑技术将人类基因、细胞或组织移植到小鼠体内，使得小鼠表现出类似人类的特征或功能。这种模型被广泛用于生物医学研究，特别是用于研究人类疾病的发病机制、药物研发以及治疗方法的评估。人源化小鼠能够提供更接近人类生理和疾病特征的模拟，有助于加深对疾病机制的理解，加速新药的开发和临床应用。小鼠人源化程度的选择取决于研究的问题和目的，我们可以只进行密码子、域、外显子、编码区的人源化，也可以进行所有区域（包括内含子和侧翼调控区）的人源化。迄今为止，文献中大多数基因组人源化小鼠都有编码序列的小规模改变，而这导致了人-小鼠嵌合蛋白的产生，并促进了对蛋白质生化关键领域的研究。然而，越来越多的对遗传病的基因治疗研究需要使用包含完整人类遗传背景的全人源化小鼠模型，特别在靶向基因组的治疗方案中。

人源化小鼠由于在模拟人类生理和病理特征方面表现出强相关性，逐步成为疾病研究工具的首选。如果要更深入地研究致病机理，就需要用上长片段甚至全基因组人源化小鼠。为此，赛业生物启动了HUGO-GT^®全基因组人源化模型计划，基于自主研发的TurboKnockout^®技术，对鼠源基因实现原位替换，成功构建了涵盖更丰富干预靶点的全基因组人源化小鼠。该小鼠搭载了更高效的大片段载体融合技术，可作为万能模板进行针对性的突变定制服务，是更贴近真实世界生物机制的药物临床前研究模型。同时，在HUGO-GT^®小鼠的基础上，我们还可以为研究人员提供眼科、神经、肿瘤免疫等疾病研究领域的CRO服务，全面赋能遗传性疾病研究以及基因治疗药物开发。