Gja3位于小鼠的14号染色体,采用基因编辑技术,通过应用高通量电转受精卵方式,获得Gja3基因敲除小鼠,性成熟后取精子冻存。
Gja3-KO小鼠模型是由赛业生物(Cyagen)采用基因编辑技术构建的全基因组敲除小鼠。Gja3基因位于小鼠14号染色体上,由两个外显子组成,其中ATG起始密码子位于2号外显子,TAG终止密码子也位于2号外显子(转录本Gja3-201:ENSMUST00000061614)。赛业生物(Cyagen)选择2号外显子作为目标区域,该区域包含1254个碱基对的编码序列。小鼠模型构建过程中,将核糖核蛋白(RNP)和靶向载体共同注入受精卵,随后出生的小鼠通过PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外,对于携带敲除等位基因的小鼠,观察到晶状体核性白内障与γ晶状体蛋白的降解相关,缺陷的严重程度受遗传背景的影响。