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HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠

全人源纳米抗体是一种新型的抗体技术,其特点在于具有纳米级的极小分子量、全人源基因来源以及高抗原亲和力。这些特点使得全人源纳米抗体能够更容易地穿透组织,包括血脑屏障,实现对疾病的精准靶向治疗。与羊驼纳米抗体相比,全人源纳米抗体的主要区别在于其基因完全来源于人类,从而避免了在人体内可能引发的免疫反应,提高了抗体的安全性和有效性。此外,全人源纳米抗体在生产上更加易于实现工业化,且稳定性高,能够在极端条件下保持生物活性。这些优势使得全人源纳米抗体在肿瘤、感染性疾病、炎症性疾病等多种疾病的治疗中展现出广阔的应用前景,成为抗体药物研发领域的重要突破。
全人源仅重链抗体小鼠(Fully Human Heavy Chain Antibody Mice)是一种经过基因改造的小鼠模型,用于产生完全人源化的仅重链抗体。它的特点在于抗体由单一的重链组成,无需轻链辅助即可与抗原结合,类似于骆驼科动物的单域抗体。全人源仅重链抗体小鼠结合了全人源抗体的临床优势和仅重链抗体的结构特点,具有高稳定性、小分子量和工程化潜力,适合用于复杂疾病靶点的开发。这种技术推动了抗体药物在新靶点开发、双特异性抗体设计及诊断工具开发中的广泛应用。
品系名称:全人源单重链抗体小鼠
品系简称:HUGO-Nano™
品系背景:C57BL/6NCya
毛色:黑色
用途:全人源单域抗体开发

HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠重链基因结构示意图

该模型使用TurboKnockout® ES打靶技术,将小鼠(i)Heavy chain恒定区修饰为表达缺失CH1区域的IgG1基因,(ii)Kappa light chain缺失,(iii)Lambda light chain缺失。
HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠
图1. HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠重链基因结构示意图
HUGO-Nano™小鼠中含有所有的人源抗体可变区序列,可变区序列与重链结合时跳过恒定区CH1,形成缺失CH1结构的重链抗体,且该小鼠缺失轻链结构。

HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠品系特点

重链VDJ可变区序列全人源化,无轻链,产生单重链抗体

HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠免疫建议

建议免疫周龄:6-8w
健康级别:Specific Pathogen Free (SPF)

HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠模型优势

  • 基于赛业自主研发的TurboKnockout® ES打靶技术。
  • 可开发出全人源胚系基因来源的纳米抗体。

HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠模型验证数据

1. 抗体序列多样性检测
采集Naive状态小鼠的脾脏,提取脾脏RNA,对样本提出的total RNA检测合格后,将下游扩增引物设置于CH2区域,进行文库构建,结合高通量测序技术,全面评估免疫系统的多样性。对测序得到的序列采用质控软件进行质量控制并过滤测序背景,然后与IMGT免疫细胞受体库的V(D)J基因比对,搜索相应的基因片段,寻找精确的VDJ基因片段和序列的位点,统计分析VDJ基因频率,克隆频率分布和多肽序列数目等信息。
HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠
图2. HUGO-Nano™小鼠脾脏B细胞中重链抗体序列VDJ重排表达检测。对Naive状态小鼠脾脏RNA进行建库,测序分析重链抗体可变区序列多样性,结果表明HUGO-Nano™小鼠重链抗体可变区序列多样性丰富,且抗体序列缺失CH1序列。
2. 免疫细胞检测
采集Naive状态小鼠的外周血,将细胞置于含封闭抗体(如Fc Block)的溶液中孵育,防止非特异性结合,按照抗体说明书的推荐浓度加入荧光标记的抗体,在冰上孵育20~30分钟,避免光照,再用PBS缓冲液清洗细胞,去除未结合的抗体。设置好激光器和滤光片参数,确保与抗体荧光匹配,将染色的细胞样品上机,按设置的参数检测荧光信号,使用流式细胞仪软件采集数据,并保存数据文件进行数据分析。
HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠
图3. HUGO-Nano™小鼠外周血中的B、T和NK细胞比例正常。取HUGO-Nano™小鼠的外周血,对其T、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。检测结果显示HUGO-Nano™小鼠外周血中的B细胞(CD3-CD19+)、T细胞(CD3+CD19-)和NK细胞(CD3-CD335+)与WT小鼠无明显差异。
3. 抗体活性分析
通过CHO-S细胞真核表达获得的Anti-PD-L1抗体与PD-L1抗原进行ELISA结合活性分析。
HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠
图4. 全人源纳米抗体结合活性分析。由ELSIA结果可知,抗PD-L1全人源纳米抗体与PD-L1抗原有不同的结合亲和力活性。
想了解更多有关HUGO-Nano™全人纳米抗体小鼠的验证数据,欢迎下载查阅《HUGO-Ab®全人源抗体小鼠》